废水处理功能菌株FA-2的实时荧光定量PCR检测

稿件作者:马欣荣
通讯作者:黄钧
刊物名称:四川大学学报(自然科学版)
发表年份:2008
卷:45
期:增刊
页码:253-257
影响因子:
文章摘要:
FA-2 是油脂化工废水处理系统中分离到的降解脂肪酸和脂肪胺的功能菌,本研究以大肠杆菌为参照菌,基于荧光定量PCR技术,建立了检测FA-2相对含量的荧光定量PCR方法,根据FA-2已知特异序列GENE2和大肠杆菌16s rRNA基因序列GENE1分别设计合成特异引物和Tagman探针,采用实时荧光定量PCR技术分别检验各样本FA-2和E.coli 16 s rRNA基因相对拷贝数,获得了FA-2及大肠杆菌的标准曲线,并比较这两种基因剂量之比例和混合的菌数比例之间的关系。结果表明混合菌液中FA-2的含量与CtGENE2和CtGENE1的差值△Ct呈线性关系,由此可以推算出模板DNA的数量及对应的细菌数量,荧光定量检测结果与直接计数结果基本一致。该方法的建立,为进一步在废水处理系统中应用FQ-PCR检测功能菌的含量打下基础。
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